目的:探讨二甲双胍通过抑制Wnt/β-catenin信号通路对胃癌干细胞增殖和凋亡的影响。方法:常规培养胃癌MKN-45细胞,并分选其干细胞,采用免疫荧光法观察分选前后MKN-45细胞中CD44+表达情况,通过流式细胞术检测分选前、后MKN-45细胞中CD44+比例,并通过免疫印迹法检测悬浮MKN-45肿瘤细胞球和贴壁细胞中性别决定区Y框蛋白2（SOX2）、八聚体结合转录因子4（OCT4）、同源域蛋白（Nanog）的蛋白表达。采用不同剂量二甲双胍（0,1,5,10 mmol/L）处理MKN-45干细胞24～72 h, RT-qPCR检测MKN-45干细胞Wnt/β-catenin信号通路基因表达情况,CCK-8法检测各组细胞增殖活力,流式细胞术检测各组细胞凋亡情况。结果:与胃癌干细胞分选前相比,分选后CD44+比例在MKN-45细胞中由5.70%富集至89.32%;悬浮MKN-45肿瘤细胞球中肿瘤干细胞标志物SOX2、OCT4、Nanog蛋白高于贴壁细胞（P<0.05）,提示胃癌干细胞分离成功。随着二甲双胍剂量的增加及处理时间的延长,MKN-45干细胞增殖活性、β-连环蛋白（β-catenin）呈下调趋势,其细胞凋亡率、糖原合成酶激酶-3β（GSK-3β）呈上调趋势（P<0.05）。结论:随着二甲双胍浓度增加及作用时间延长,胃癌干细胞增殖活性增强,凋亡率降低,其作用原因可能与抑制Wnt/β-catenin信号通路的激活有关。