目的:探讨顶空一次平衡法和二次平衡法在大鼠吸入七氟烷麻醉后血中生成游离六氟异丙醇（HFIP）浓度测定中的联合应用。方法:选取42只健康成年SD大鼠，其中6只采血用于测定标准品HFIP的血/气分配系数（B/G）,将其余大鼠随机分成6组，分别接受1.0 MAC（2.32%）浓度的七氟烷麻醉0.5 h（S1组）、1.0 h（S2组）、1.5 h（S3组）、2.0 h（S4组）、3.0 h（S5组）、4.0 h（S6组）,每组各6只。随后立即腹主动脉取血5～7 mL,使用一次平衡法联合二次平衡法测定血中游离HFIP及七氟烷浓度。结果:6个时点均能测出七氟烷的代谢产物游离HFIP浓度，但含量较低，最大浓度出现在S2组（0.81%）。血中七氟烷浓度随着吸入麻醉时间的延长逐渐增加，而血中游离HFIP随着七氟烷麻醉时间的延长呈先增加后降低的趋势。结论:联合应用一次平衡法和二次平衡法能有效测定大鼠血中HFIP浓度，可为七氟烷的代谢研究奠定方法学基础。